Hazırlanması Bir poliakrilamid jel içinde yuvaları ile hazırlanır. Jel, sığ bir kutu içine bir sıcak sıvı poliakrilamid çözeltisi dökülerek oluşturulur. Kutuçözeltisi içine indirmiyorsun dişleri olan bir yapı comblike içermelidir. Poliakrilamid bu döküldükten hemen sonra , bir jel haline gelir ve tarak dikdörtgen delikler ortaya çıkarılır.
Dodesil sülfat (SDS)
proteini ile muamele edilir Sodyum büyük bir protein böylece her birialt birimlerini denatüre edilmesi amacıyla sodyum dodesil sülfat (SDS ), ayrı olarak ölçülebilmektedir. Bunun avantajları,jel , negatif ucu ya da anoda doğru yer değiştirmesini sağlayacak şekilde , SDSpolipeptidleri , bir negatif yük vermektedir olmasıdır. İkincisi,SDS tüm alt birimleri tüm moleküler kitlelerin yerine suçlamalara görejel göç edecek , bu nedenleaynı yüke sahiptir ve emin kılar .
Protein
Toplama
DNA ya da proteinin miktar , jelin bir ucundadikdörtgen deliklerden birine yerleştirilir. Bir elektrik akımı , nötr pH'tajel ile çalıştırılır. DNA merdiveni yaklaşık 10 mikrolitre ile birlikte iki kontrol de jele yüklenir. DNA merdiveniörnek elektroforezi sürecinde taşındı ne kadar uzak ölçümünü sağlamak için kullanılır .
Elektroforez
Makine daha sonra 100 volta açık ve let 30 dakika boyunca çalıştırın. Numuneler 30 dakika için elektroforezlenmeden sonra, bir tepsi ile birliktejel, çıkarılır ve yaklaşık üç dakika süreyle boyama tepsiye yerleştirilir. Bu daha sonra , beş dakika için ılık sudajel yerleştirilmesi izler. Jel artık DNA fragmanlarının hareketini gözlemlemek amacıyla ışık kutusuna yerleştirilmek üzere hazırdır.
Diğer hususlar
ışık altında jel görüntülerken , bazı önemli noktalar göz önüne alınmalıdır. Bir hücreya da her iki kopyası mevcut kopya olarak mevcut olmayan ya da sadece birinde olup olmamasına bağlı olarak, gen için heterozigoz ya da homozigoz olarak mevcut olabilir . Amplifiye edilmiş DNAsegmentleri daha verimli bir jel içinde koyu görünür , çünkü heterozigot sonucu, tek bir bant olarak ortaya çıkabilir. Bir boya da elektroforez sırasında ve sonrasında bu nedenle her bir polipeptid görülebilir ilave edildi.