Ana Karakterler:
* Sherlock Holmes: Tümdengelimli akıl yürütme ve gözlem becerileriyle tanınan parlak dedektif.
* Dr. John H. Watson: Holmes'un sadık arkadaşı ve tarihçisi, çoğu zaman okuyucunun bakış açısı olarak hizmet ediyor.
* Mary Morstan: Babasının ortadan kaybolması ve aldığı gizemli "Dört İşareti" hakkında bilgi arayan genç bir kadın.
* Jonathan Small: Agra hazinesinin ve "Dörtlü İşaret"in çalınmasının ardındaki hain ama sonuçta trajik beyin.
* Thaddeus Sholto: Jonathan Small'un Agra hazinesinin bir kısmını miras alan eski suç ortağı. Hikaye başlamadan önce öldürülür.
* Athelney Jones: Bir Scotland Yard dedektifi, aşırı metodik ve daha az sezgisel yaklaşımı nedeniyle Holmes tarafından sıklıkla alay ediliyor.
Diğer Önemli Karakterler:
* Bayan. Hudson: Holmes ve Watson'ın ikamet ettiği Baker Caddesi 221B'nin ev sahibesi.
* Tonga Kabilesi: Andaman Adaları'ndan Jonathan Small'a sadık ve onun planlarını uygulayan bir grup yerli.
* "Dörtlü İşaret": Dört benzersiz nesneye verilen ad:gümüş bir iğne, süslü küçük bir kutu, bir parça kurşun boru ve bir köpek tasması. Bu eşyalar Agra hazinesinin çalınmasıyla bağlantılı.
Destekleyici Karakterler:
* Bartholomew Sholto: Agra hazinesinin bir kısmını miras alan ve Jonathan Small'un hedefi haline gelen Thaddeus'un erkek kardeşi.
* Bayan. Sholto: Thaddeus ve Bartholomew'in güvenliklerinden endişe duyan annesi.
* Bayan. Morstan (Mary'nin annesi): Bir zamanlar Thaddeus Sholto'ya aşık olan ve gizemli koşullar altında ölen bir kadın.
* Müfettiş Bradstreet: Athelney Jones'la çalışan bir Scotland Yard müfettişi.
Hikaye öncelikle ana karakterlere odaklansa da birçok yardımcı karakterin olay örgüsüne katmanlar eklediğini ve romanın genel atmosferine katkıda bulunduğunu unutmamak önemlidir.